Utilidad de la línea celular de origen tumoral A-Mel-3 en la evaluación de la citotoxicidad por metales pesados / Utility of A-Mel-3 tumoral cell line on the cytotoxic assessment of heavy metals

Cadmio y mercurio son los metales pesados más tóxicos y todos los seres vivos, incluido el hombre, sufren los efectos de su exposición. Las altas dosis de cadmio y de mercurio determinan alteraciones morfológicas generalmente bien conocidas. Sin embargo, al igual que ocurre con las alteraciones bioquímicas, los cambios ultraestructurales producidos por dosis subletales no están claramente definidos. Este hecho tiene una especial trascendencia ya que los seres vivos están expuestos a dosis bajas de estos metales durante toda la vida, principalmente como consecuencia de su presencia en los alimentos y en el medio ambiente. Por otro lado, la monitorización de los efectos tóxicos in vivo está dejando paso a la realización de estudios mediante técnicas in vitro. Estos estudios, que normalmente se llevan a cabo Sobre tejidos obtenidos de animales sanos, utilizan con frecuencia los análisis ultraestructurales, ya que éstos pueden ayudar a dilucidar los mecanismos de acción de dichos agentes. En el presente estudio hemos analizado los efectos in vitro que dosis subletales de metales pesados (cadmio y mercurio) producen sobre células de la línea de origen tumoral A-Mel-3 con el objetivo de estudiar los efectos de dichas dosis y la utilidad de estas células en este tipo de estudio. Previamente a los experimentos con los metales, se estudiaron las características morfológicas de las células, así como su crecimiento. Mediante el ensayo del Rojo Neutro (RN) se determinó el rango de concentraciones de cada metal con efecto sobre la viabilidad celular. Para el estudio morfológico, las células fueron expuestas a una concentración que producía una reducida pérdida de viabilidad (0-10 por ciento) así como a la, concentración con efecto máximo de cada metal (100 por ciento de pérdida de viabilidad), obtenidas por el ensayo del RN. A altas concentraciones las alteraciones estructurales producidas eran fácilmente visibles. A bajas concentraciones no encontramos alteraciones estructurales, mientras que, a nivel ultraestructural, sí se apreciaron, además de otras alteraciones, hipertrofia y tumefacción de ciertas organelas citoplásmicas (AU)

Comparación de dos métodos colorimétricos en la evaluación citotóxica de metales pesados en cultivos de células renales / Comparison of two colorimetric methods on the heavy metals cytotoxic assessment on renal cell cultures

En el presente trabajo se ha evaluado la capacidad citotóxica del plomo, cadmio y mercurio en tres líneas celulares de origen renal (BGM, VERO y PK-15). Los resultados de la exposición aguda á estos metales, se evaluaron mediante técnicas colorimétricas basadas en la exclusión de colorante vital MTT tetrazolio (MTT) y Rojo Neutro (RN). La línea PK-15 precisó un rango de concentraciones más amplio, para contrastar los efectos del plomo y mercurio, mientras que la línea BGM fue la que presentó esta característica para el cadmio. Con la técnica del RN, la citotoxicidad de todos los metales se evidenció en un rango de concentraciones más estrecho que con la técnica NITT, excepto en las combinaciones VERO-cadmio y PK(15)-mercurio. En cuanto a los metales, el plomo fue el que marcó una menor toxicidad para todas las líneas y técnicas colorimétricas. El mercurio fue el metal más tóxico en las líneas BGM y VERO y el cadmio lo fue para la línea PK-15. Se discute la utilidad de comparación del efecto citotóxico de estos metales en base a un nivel sin efecto observable (NSEO), concentración efectiva 50 (CESO), concentración efectiva 100 (CE100) y toxicidad en función de la pendiente, así como en función de la técnica colorimétrica empleada y de las líneas celulares (AU)